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[1]劉玲,陳祥平,範小敏,等.桑樹SSR-PCR反應體系的優化[J].江蘇農業科學,2019,47(14):45-49,58.
 Liu Ling,et al.Optimization of SSR-PCR reaction system for mulberry[J].,2019,47(14):45-49,58.
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桑樹SSR-PCR反應體系的優化(PDF)
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《江蘇農業科學》[ISSN:1002-1302/CN:32-1214/S]

卷:
第47卷
期數:
2019年第14期
頁碼:
45-49,58
欄目:
生物技術
出版日期:
2019-08-10

文章信息/Info

Title:
Optimization of SSR-PCR reaction system for mulberry
作者:
劉玲1 陳祥平1 範小敏1 傅曉2 柯皓天2 呂銀2
1.四川省絲綢科學研究院,四川成都 610031; 2.四川省絲綢工程技術研究中心,四川成都 610031
Author(s):
Liu Linget al
關鍵詞:
桑樹正交試驗設計單因素試驗SSR-PCR反應體系優化
Keywords:
-
分類號:
S888.2
DOI:
-
文獻標志碼:
A
摘要:
爲了建立經濟穩定的桑樹簡單重複序列(SSR)-PCR反應體系,爲SSR分子標記在桑樹研究中更廣泛地應用提供試驗基礎,采用L16(45)正交試驗設計和單因素試驗,對桑樹SSR-PCR反應體系中的模板DNA濃度、引物濃度、Mg2+濃度、dNTPs濃度和rTaq酶用量5個因素的4個水平進行優化分析,並比較這5個因素的不同濃度對擴增效果的影響。結果表明,各因素水平變化對反應體系的影響大小依次爲Mg2+、dNTPs>引物>模板DNA>rTaq酶。研究最終確立了最佳反應體系,即在10 μL反應體系中,含有1.5 μL 10~20 ng/μL DNA模板、0.4 μL 25 mmol/L Mg2+、0.5 μL 2 mmol/L dNTPs、各0.15 μL 20 μmol/L正反向引物、0.1 μL 5 U/μL rTaq酶和1 μL 10×loading buffer。通過穩定性檢測,表明該體系能夠用于桑樹的SSR分析。
Abstract:
-

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備注/Memo

備注/Memo:
收稿日期:2018-04-28
基金項目:四川省科技計劃(編號:2017JY0277);四川省科技創新産業鏈項目(編號:2016NZ0004)。
作者簡介:劉玲(1989—),女,山西大同人,碩士,助理工程師,主要從事桑樹的分子標記工作。E-mail:liuling1022@yeah.net。
更新日期/Last Update: 2019-07-20